Es sollten die Wirkungen und der Mechanismus eines gepulsten elektrischen Feldes auf Insulin und seine nachfolgende Vermittlung bei Veränderungen in der Proliferation von menschlichen Hepatozyten in vitro untersucht werden.
Die Insulin-Lösung wurde bei einem gepulsten elektrischen Feld exponiert und zu dem Kultur-Medium der Hepatozyten hinzugefügt. Insulin wird üblicherweise ins Kultur-Medium gegeben, um das Zellwachstum zu beschleunigen.
Exposition | Parameter |
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Exposition 1:
50 kHz
Modulationsart:
gepulst
Expositionsdauer:
kontinuierlich für 10 min, 20 min und 40 min
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Frequenz | 50 kHz |
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Typ | |
Signalform | |
Expositionsdauer | kontinuierlich für 10 min, 20 min und 40 min |
Modulationsart | gepulst |
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Pulsbreite | 20 µs |
Anstiegszeit | 12 µs |
Folgefrequenz | 50 Hz |
Expositionsquelle |
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Aufbau | 96-well micro-plate containing insulin stock solution was placed between the two plates, which were 16 mm apart. |
Schein-Exposition | Eine Schein-Exposition wurde durchgeführt. |
Messgröße | Wert | Typ | Methode | Masse | Bemerkungen |
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elektrische Feldstärke | 7,1 V/m | Maximum | geschätzt | - | - |
Gepulste elektrische Felder erzeugten eine Konformations-Veränderung des Insulin-Moleküls. Das Bindungsvermögen von Insulin an seine Rezeptoren wurde im Vergleich zur Kontrolle nach der gepulsten elektrischen Feld-Exposition um 87 % vermindert. Der durchschnittliche intrazelluläre Tyrosin-Phosphorylierungs-Grad war um 11% reduziert. Die Expression von 55 von 12000 untersuchten Genen war modifiziert, einschließlich einer erhöhten Expression der humanen Tyrosin-Phosphatase und des kleinen GTP-Bindeproteins.
Basierend auf diesen Ergebnissen wird ein Mechanismus vorgeschlagen, um die biologischen Wirkungen gepulster elektrischer Felder auf die Hepatozyten-Proliferation durch einen Insulin-Signalweg zu erklären.
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