Es sollte die Rolle von p53 während der Exposition bei gepulsten elektrischen Feldern im Nanosekunden-Bereich (nsPEF) untersucht werden.
Es wurden Kolon-Karzinom-Zellen (HCT116p53+/+ und p53-/-) verwendet, die eine Knockout-Zelllinie liefern, mit denen spezifisch die Rolle von p53 getestet werden kann.
Exposition | Parameter |
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Exposition 1:
Modulationsart:
einzelner Puls
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Exposition 2:
Modulationsart:
einzelner Puls
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Frequenz |
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Typ | |
Signalform |
Messgröße | Wert | Typ | Methode | Masse | Bemerkungen |
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elektrische Feldstärke | 60 kV/cm | Maximum | - | - | 16, 26, 40, 60 kV/cm |
Frequenz |
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Typ | |
Signalform |
Expositionsquelle |
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Messgröße | Wert | Typ | Methode | Masse | Bemerkungen |
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elektrische Feldstärke | 60 kV/cm | Maximum | - | - | 12, 18, 26, 40, 60 kV/cm |
Die Ergebnisse zeigen direkte elektrische Feld-Wirkungen auf die HCT116 Kolon-Karzinom-Zellen sowie auf biologische Reaktionen der Zellen, die abhängig und unabhängig von p53 sind. Eine Exposition bei nsPEF deckt p53-abhängige Einflüsse auf das Zell-Überleben auf, einschließlich Wirkungen auf die Zellmembran.
Abnehmende Zellmembran-Wirkungen wurden sowohl bei HCT116p53+/+ als auch bei p53-/- -Zellen mit abnehmender Puls-Dauer und/oder abnehmenden elektrischen Feldstärken aufgedeckt. Allerdings erzeugte das Hinzufügen von Ethidium-Homodimer-1 (zur Messung der Zellmembran-Permeabilität/Intaktheit) und Annexin-V-FITC (deutet auf Phosphatidylserin-Externalisierung hin) nach dem Puls eine größere Fluoreszenz bei p53-/- gegenüber p53+/+ -Zellen, was auf eine p53-abhängige biologische Wirkung "nach Puls" auf die Zellmembran hindeutet.
Die Caspase-Aktivität war nur bei p53-/- -Zellen signifikant höher.
HCT116-Zellen wiesen ein höheres Überleben gegenüber nsPEF auf als HL-60-Zellen und Jurkat-Zellen, aber das Überleben war bei HCT116p53+/+ -Zellen evidenter als bei HCT116p53-/- -Zellen.
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