この研究は、骨芽細胞様細胞に対する超低周波パルス電磁界(PEMF)の影響を調べた。48 Hz、1.55 mTのPEMFばく露をさまざまなばく露時間で細胞に与えた。実験に用いた2種類の細胞はいずれも2日齢のSprague Dawleyラット頭蓋冠に由来するMC3T3-E1細胞と初代骨芽細胞である。MTS法で細胞増殖を、フローサイトメトリで細胞周期を検出した。細胞内アルカリホスファターゼ(ALP)活性を比色法で測定した。その結果、PEMFにより、MC3T3-E1細胞の細胞数は影響を受けなかったが、SとG(2)M期の細胞割合が有意に減少した;初代骨芽細胞の細胞数は、PEMFの24時間連続ばく露後に変化しなかったが、SおよびG(2)M期の細胞割合は有意に増加した;培養時間を48時間に延長すると、細胞数は大きく増加し、SおよびG(2)M期の細胞割合は、ばく露タイプにかかわらず有意に減少した;初代骨芽細胞では、PEMFの24時間連続ばく露後にALP活性が有意に低下したが、48時間連続ばく露後にはALP活性は有意に上昇した;これらの知見は、48 Hz、1.55 mTのPEMFはMC3T3-E1細胞の増殖と分化に影響を及ぼさなかったが、初代骨芽細胞では、増殖段階で増殖を促進し、分化を抑制し、分化段階で分化を促進することが示唆された、と報告している。
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To study whether the effects of extremely low frequency pulsed electromagnetic fields on cell proliferation, cell cycle and cell differentiation are similar in different-derived osteoblast-like cells (primary cell culture and cell line).
The effects of magnetic fields on morphology, proliferation, differentiation and mineralization of different kinds of osteoblast cells are studied to elucidate the mechanisms of osteogenesis.
cells were treated in four ways: i) cells cultured for 24 h under PEMF ii) cells cultured for 24 h without PEMF, then exposed for another 24 h to PEMF iii) cells exposed to PEMF for 24 h, then cultured for another 24 h without PEMF iv) cells exposed to PEMF for 48 h
周波数 | 48 Hz |
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タイプ |
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波形 |
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ばく露時間 | continuous for 24 h or 48 h |
Modulation type | pulsed |
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Pulse width | 13 ms |
Repetition frequency | 48 Hz |
Pulse type | monophasic |
ばく露の発生源/構造 | |
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ばく露装置の詳細 | 160 turns of 2.06 mm enamel copper wire wound around a 350 mm long cylindrical tube made of epoxy resins with an inner diameter of 190 mm, so that two sub-coils were created; cells placed in the center of the solenoid that was inside an incubator |
Sham exposure | A sham exposure was conducted. |
測定量 | 値 | 種別 | Method | Mass | 備考 |
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磁束密度 | 1.55 mT | - | 測定値 | - | - |
1) MC3T3-E1 cells: Exposure to extremely low frequency pulsed electromagnetic field did not affect the cell number. The cell percentage of S phase and G2 phase decreased significantly after 24 h and 48 h. No alkaline phosphatase activity was detected.
2) Primary osteoblast cells: The cell number did not alter after 24 h continuous exposure, but increased greatly after 48 h. The cell percentage of S phase and G2 phase increased significantly after 24 h and decreased significantly after 48 h. The alkaline phosphatase activity decreased significantly after 24 h exposure and increased significantly after 48 h exposure.
In conclusion, in contrast to the MC3T3-E1 cell line, the primary osteoblast cells seemed to be more sensitive to the extremely low frequency-pulsed electromagnetic field.
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